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月示蛋白胨具体该如何使用呢？

发布时间： 2025-11-23　　点击次数： 49次

　　月示蛋白胨是一种重要的微生物培养基原料，在微生物学研究和生物发酵领域应用广泛。其是混合酶消化组织蛋白，是用精蛋白为基质，经特殊水解提取制备的干燥粉末，营养丰富，富含大量高分子质量多肽、游离氨基酸和生长促进因子，可做多种培养基的基础材料。适宜于细菌产毒素培养和营养要求苛刻的微生物培养。蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂，具有肉香的特殊气息。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。
　　月示蛋白胨其使用方法需结合培养基的配制流程进行，以下是详细步骤：
　　1、计算与称量
　　根据目标微生物的营养需求，按配方比例计算月示蛋白胨的用量（如每升培养基添加10-20g）。
　　使用洁净的称量工具（如电子天平、牛角匙）快速称取蛋白胨，避免长时间暴露吸湿。若需与其他成分（如牛肉膏、NaCl）混合，需按顺序依次称取，并防止交叉污染。
　　2、溶解与混合
　　将称取的蛋白胨加入适量蒸馏水或去离子水中，用玻璃棒搅拌至初步溶解。
　　若配方含其他成分（如葡萄糖、琼脂），需分步溶解：先溶解蛋白胨等易溶物质，再加入难溶成分（如琼脂需加热溶解），最后补足水量至所需体积。
　　3、调节pH值
　　用精密pH试纸或酸度计测量溶液原始pH值。
　　若pH偏低，逐滴加入1mol/L NaOH溶液；若偏高，则加入1mol/L HCl溶液，边加边搅拌并实时监测pH，直至达到目标值（如7.2-7.6）。
　　注意：避免pH调节过头，否则需回调，可能影响培养基离子浓度。
　　4、过滤（可选）
　　若培养基需高度透明（如用于观察菌落形态），可趁热用滤纸或多层纱布过滤，去除杂质。
　　普通实验可省略此步骤。
　　5、分装与包扎
　　液体培养基：分装至试管或三角瓶，装量不超过容器容积的1/2（试管装至1/4高度，便于摇匀）。
　　固体培养基：分装后加入琼脂（1.5%-2%），加热溶化后分装，灭菌后冷却凝固成斜面或平板。
　　包扎：试管口塞棉塞（或泡沫塑料塞），外包牛皮纸并用麻绳扎紧；三角瓶同样包扎，标注培养基名称、配制日期。
　　6、灭菌
　　采用高压蒸汽灭菌法：121℃（0.103MPa）灭菌15-20分钟。
　　特殊情况：若培养基含葡萄糖等易分解成分，可分开灭菌（蛋白胨溶液与葡萄糖溶液分别灭菌后混合），或在中性pH条件下灭菌再调pH。
　　7、使用与储存
　　使用前：检查培养基是否浑浊、有无污染（如长菌斑）。
　　使用中：无菌操作下倾注平板或接种微生物，按目标条件培养（如35℃、18-24小时）。
　　储存：未灭菌的培养基需冷藏（2-8℃）；灭菌后培养基若未及时使用，应冷藏保存并在1周内用完。

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